En savoir plus

Notre utilisation de cookies

« Cookies » désigne un ensemble d’informations déposées dans le terminal de l’utilisateur lorsque celui-ci navigue sur un site web. Il s’agit d’un fichier contenant notamment un identifiant sous forme de numéro, le nom du serveur qui l’a déposé et éventuellement une date d’expiration. Grâce aux cookies, des informations sur votre visite, notamment votre langue de prédilection et d'autres paramètres, sont enregistrées sur le site web. Cela peut faciliter votre visite suivante sur ce site et renforcer l'utilité de ce dernier pour vous.

Afin d’améliorer votre expérience, nous utilisons des cookies pour conserver certaines informations de connexion et fournir une navigation sûre, collecter des statistiques en vue d’optimiser les fonctionnalités du site. Afin de voir précisément tous les cookies que nous utilisons, nous vous invitons à télécharger « Ghostery », une extension gratuite pour navigateurs permettant de les détecter et, dans certains cas, de les bloquer.

Ghostery est disponible gratuitement à cette adresse : https://www.ghostery.com/fr/products/

Vous pouvez également consulter le site de la CNIL afin d’apprendre à paramétrer votre navigateur pour contrôler les dépôts de cookies sur votre terminal.

S’agissant des cookies publicitaires déposés par des tiers, vous pouvez également vous connecter au site http://www.youronlinechoices.com/fr/controler-ses-cookies/, proposé par les professionnels de la publicité digitale regroupés au sein de l’association européenne EDAA (European Digital Advertising Alliance). Vous pourrez ainsi refuser ou accepter les cookies utilisés par les adhérents de l'EDAA.

Il est par ailleurs possible de s’opposer à certains cookies tiers directement auprès des éditeurs :

Catégorie de cookie

Moyens de désactivation

Cookies analytiques et de performance

Realytics
Google Analytics
Spoteffects
Optimizely

Cookies de ciblage ou publicitaires

DoubleClick
Mediarithmics

Les différents types de cookies pouvant être utilisés sur nos sites internet sont les suivants :

Cookies obligatoires

Cookies fonctionnels

Cookies sociaux et publicitaires

Ces cookies sont nécessaires au bon fonctionnement du site, ils ne peuvent pas être désactivés. Ils nous sont utiles pour vous fournir une connexion sécuritaire et assurer la disponibilité a minima de notre site internet.

Ces cookies nous permettent d’analyser l’utilisation du site afin de pouvoir en mesurer et en améliorer la performance. Ils nous permettent par exemple de conserver vos informations de connexion et d’afficher de façon plus cohérente les différents modules de notre site.

Ces cookies sont utilisés par des agences de publicité (par exemple Google) et par des réseaux sociaux (par exemple LinkedIn et Facebook) et autorisent notamment le partage des pages sur les réseaux sociaux, la publication de commentaires, la diffusion (sur notre site ou non) de publicités adaptées à vos centres d’intérêt.

Sur nos CMS EZPublish, il s’agit des cookies sessions CAS et PHP et du cookie New Relic pour le monitoring (IP, délais de réponse).

Ces cookies sont supprimés à la fin de la session (déconnexion ou fermeture du navigateur)

Sur nos CMS EZPublish, il s’agit du cookie XiTi pour la mesure d’audience. La société AT Internet est notre sous-traitant et conserve les informations (IP, date et heure de connexion, durée de connexion, pages consultées) 6 mois.

Sur nos CMS EZPublish, il n’y a pas de cookie de ce type.

Pour obtenir plus d’informations concernant les cookies que nous utilisons, vous pouvez vous adresser au Déléguée Informatique et Libertés de l’INRA par email à cil-dpo@inra.fr ou par courrier à :

INRA
24, chemin de Borde Rouge –Auzeville – CS52627
31326 Castanet Tolosan cedex - France

Dernière mise à jour : Mai 2018

Menu SNE

Société de Neuroendocrinologie

Zone de texte éditable et éditée et rééditée

Ravni Aurélia

05 octobre 2007

Etude fonctionnelle des gènes régulés au cours de la différenciation des cellules PC12 induite par le NGF et le PACAP

Les cellules PC12 constituent un modèle très largement utilisé pour étudier les mécanismes cellulaires et moléculaires impliqués dans la différenciation neuronale. En particulier, il a été montré que dans ces cellules, la neurotrophine nerve growth factor (NGF) et le neuropeptide pituitary adenylate cyclase-activating polypeptide (PACAP) exercent de puissants effets pro-différenciateurs qui se manifestent entre autre par l'apparition de prolongements cytoplasmiques, une augmentation du volume cellulaire et un arrêt de la prolifération.

Ces effets du NGF et du PACAP sur la différenciation des cellules PC12 sont mimés par des stimulateurs de l'adénylyl cyclase, comme la forskoline, et des analogues de l'AMPc, comme le dbcAMP. L'utilisation d'inhibiteurs spécifiques de différentes voies de transduction révèle que la neuritogenèse est indépendante de l'activation de la protéine kinase A (PKA) mais requiert la phosphorylation de l'extracellular signal-regulated kinase (ERK). En partant de ces observations, le but de notre étude a été d'identifier de nouveaux mécanismes moléculaires impliqués dans la différenciation des cellules PC12. Les gènes activés par le NGF, le PACAP et l'AMPc ont été identifiés par microarrays. Nous avons ensuite sélectionné les gènes induits par les deux facteurs neurotrophiques et l'AMPc puis, à l'aide d'inhibiteurs spécifiques, nous avons recherché par PCR en temps réel ceux dont la stimulation ne nécessite pas l'action de la PKA mais requiert la phosphorylation de ERK. Cette approche, combinée à une analyse bibliographique, nous a conduits à sélectionner quelques gènes dont la villine 2, l'immediate early response 3 (Ier3), l'early growth response 1 (Egr1) et la serine proteinase inhibitor, clade B, member (serpine b1a). Nous avons ensuite recherché la fonction de ces gènes en utilisant la technique des ARN d'interférence (siRNA). Les résultats indiquent que la villine 2 est impliquée dans l'augmentation du volume cellulaire alors que Egr1 contrôle la neuritogenèse sans modifier la prolifération des cellules. En revanche, Ier3 et la serpine b1a n'affectent aucun des effets observés au cours de la différenciation des cellules PC12. Le NGF et le PACAP étant aussi capables de favoriser la survie de ces cellules lorsqu'elles sont cultivées en conditions induisant leur apoptose, nous avons dans un second temps recherché l'implication de la serpine b1a dans ce processus. Les résultats montrent que l'expression de la serpine b1a induit une diminution significative de l'activité de la caspase-3, une protéase clé de la cascade apoptotique. Cet effet de la serpine b1a sur l'activité de la caspase-3 s'accompagne d'une augmentation de la survie des cellules PC12 cultivées en l'absence de sérum mettant ainsi en évidence l'implication de ce gène dans l'effet neuroprotecteur du PACAP et du NGF.

En conclusion, ces travaux ont permis de caractériser certaines voies de transduction et quelques gènes impliqués dans les effets du NGF et/ou du PACAP sur la différenciation et la survie des cellules PC12. Ces données ouvrent de nouveaux axes de recherche pour l'étude de la différenciation neuronale qui pourraient à terme permettre le développement de stratégies thérapeutiques pour le traitement d'accidents vasculaires cérébraux ou de maladies neurodégénératives, telles que l'Alzheimer ou le Parkinson.

Mots Clés: NGF, PACAP, cellules PC12, différenciation, neuritogenèse, AMPc, Egr1, Villine 2, Serpine b1a, Ier3

Présentée le 5 octobre 2007

Laboratoire où a été préparée la thèse :
Unité INSERM 413, Laboratoire de Neuroendocrinologie Cellulaire et Moléculaire, 5 place Emile Blondel, 76821 Mont Saint Aignan Cedex

Nom du directeur de thèse: Dr David VAUDRY