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Société de Neuroendocrinologie

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Séverine Devavry

19 décembre 2011

Récepteurs de la mélatonine : pharmacologie du récepteur ovin MT2, identification de leur activité constitutive et développement d’une approche par ARN interférent

La mélatonine est une hormone synthétisée et sécrétée uniquement la nuit par la glande pinéale. Son rôle principal est son implication dans la synchronisation de la saison de reproduction. La mélatonine se lie aux récepteurs, MT1 et MT2, membres de la famille des récepteurs à sept domaines transmembranaires couplés aux protéines G (RCPG).

Le clonage récent du récepteur ovin MT2 a remis en cause toutes les données connues. La pharmacologie et les voies de signalisation du récepteur oMT2 ont été étudiées et sont communes à celles des récepteurs des autres espèces. En revanche, oMT2 possède une originalité de séquence avec la présence du motif DRY, fortement impliqué dans l’établissement de l’activité constitutive des RCPG. D’une part, nous avons montré que l’ensemble des récepteurs MT possèdent une activité constitutive. D’autre part, nous avons identifié deux agonistes inverses pour les récepteurs hMT2, initialement décrits comme antagonistes. Dans l’optique de discriminer les rôles respectifs des récepteurs MT in vivo, le développement d’une approche par ARN interférents a été validée dans un modèle cellulaire, la lignée CHO-K1 exprimant les récepteurs ovins et de rat.

Mots-clés : Mélatonine, RCPG, ovin, activité constitutive, agonistes inverses

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Melatonin is a hormone synthesized and secreted only during night by pineal gland. A main role of melatonin concerns its implication in the synchronisation of reproductive seasonality. Binding sites of melatonin are MT1 and MT2 receptors which belong to the superfamily of seven-transmembrane-spanning G protein-coupled receptors (GPCRs).

Recent cloning of ovine MT2 receptor has challenged the knowledge about melatonin receptors. We demonstrated that its pharmacology and signalling pathways were similar to subtype 2 receptor of others species (human and rat). Nevertheless, oMT2 receptor possesses a particularity of sequence, with the presence of DRY motif which is known to be involved in the establishment of constitutive activity of GPCRs. In our study, we demonstrated the existence of constitutive activity for all the melatonin receptors. In addition, we identified two inverse agonists for human MT2 receptors, previously described as antagonists. To describe the respective roles of each subtype of melatonin receptors in vivo, siRNA approach was developed in cell line CHO-K1 expressing ovine and rat melatonin receptors.

Key words: Melatonin, GPCR, ovine, constitutive activity, inverse agonists,

Présentée le 19 décembre 2011

Laboratoire où a été préparée la thèse :

- UMR INRA-CNRS-Université de Tours-Haras Nationaux, Physiologie de la Reproduction et des Comportements, Equipe : Neurobiologie Intégrative de la Reproduction
- Institut de Recherches Servier, Département de Biotechnologies, Pharmacologie moléculaire et cellulaire

Nom du directeur de thèse : Benoît Malpaux